程序外DNA合成试验
程序外DNA合成试验 : 检测程序外DNA合成量的试验,简称UDS试验。试验的原理:培养的受试细胞在外界因素作用下,如果DNA受到损伤,细胞利用DNA修复机制,将受损的DNA进行修复。当培养液中加入放射性标记的3H-TdR(3H-胸腺嘧啶核苷),3H-TdR就会掺入到新合成的DNA中。3H-TdR掺入的量与修复的DNA量呈正比,在DNA修复机制正常情况下可根据修复的DNA量,也即按3H-TdR掺入的量估计DNA的受损程度。3H-TdR掺入量可用液体闪烁仪直接测得。本试验中为了避免S期DNA合成对UDS测定的影响,测试系统中选择体外不进行有丝分裂的细胞,如肝细胞和淋巴细胞,并加入羟基脲以抑制程序性DNA合成。用氮芥作阳性对照物,应诱发UDS增高。一般以测试组的UDS值(cpm或dpm)是溶剂对照组的2倍或2倍以上,可判断为阳性结果。在分析结果应注意,当受试因子既引起DNA损伤,又损害了DNA的修复机制,则UDS值可不增高,为假阴性结果。为了正确判断这种现象设一组既有受试因子作用,又有氮芥作附加处理。如果DNA修复机制未受损,UDS值必将升高,则单独受试因子组出现阴性结果时表示是真正的阴性,若加了氮芥UDS值不升高,则表示DNA修复机制也受损。